研究RNA干扰(RNAi)技术沉默同源异型基因A5(HOXA5)对白血病耐阿霉素细胞株K562/ADM细胞耐药性的影响并探讨其机制。方法 Western blot检测各组细胞中HOXA5、p38和p-p38的蛋白表达,q RT-PCR检测HOXA5、p38的m RNA表达;CCK8检测各组细胞对阿霉素的敏感性变化;流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡及周期变化。结果 K562/ADM细胞中HOXA5基因的表达高于K562细胞,且其耐药性是K562细胞的4.94倍。转染后实验组K562/ADM细胞中HOXA5基因的表达受抑制,而实验组细胞的IC50较对照组降低2.55倍。同时,实验组细胞中p38的m RNA及p-p38的蛋白表达高于对照组。与对照组比较,实验组的细胞周期G0/G1期增高,S期降低。经ADM(2.5μg/ml)诱导后,实验组细胞凋亡率高于对照组。结论 RNAi沉默HOXA5能在一定程度上逆转白血病耐药,其机制可能与p38MAPK信号转导通路的激活有关。 

文内图片：

普通倒置相差显微镜及荧光显微镜下转染的各组K562/ADM细胞

各组细胞中HOXA5、p38及p-p38的蛋白表达β-actin（42kD）